Lorsqu'elle est utilisée en cuisine, les différences de saveur entre l'huile de truffe blanche et noire sont extrêmement subtiles. Ainsi, l'huile de truffe blanche et noire peut être utilisée de manière interchangeable. La saveur et l'arôme intenses de l'huile de truffe sont créés par l'utilisation de composés chimiques qui imitent ceux trouvés dans les vraies truffes. L'huile de truffe est souvent produite en combinant un gaz aromatique connu sous le nom de 2,4-dithiapentane avec de l'huile d'olive ou de l'huile de tournesol.
Il existe des différences de saveurs entre les vraies truffes noires et blanches extraites du sol. Les truffes noires ont un goût terreux et un arôme piquant, tandis que les truffes blanches ont un parfum musqué avec une saveur qui a des notes d'ail et d'échalotes. Parce que les truffes fraîches sont chères et rares, l'huile de truffe est utilisée comme substitut dans de nombreux plats. Les produits chimiques artificiels tels que le 2,4-dithiapentane reproduisent les gaz naturels produits par les vraies truffes. Certaines personnes n'aiment pas la nature artificielle de l'huile de truffe commerciale et notent que les truffes naturelles produisent jusqu'à 30 gaz différents, une complexité d'arômes difficile à reproduire synthétiquement.
L'huile de truffe est normalement appliquée sur les aliments avant de servir. Quelques gouttes suffisent pour rehausser la saveur des plats. Bien que certaines huiles de truffe contiennent des morceaux de truffes séchées, celles-ci ne contribuent généralement pas à la saveur de l'huile.