Les éléments couverts dans une clé dichotomique incluent si les bactéries sont Gram positif ou négatif, catalase positive ou négative, ont des enzymes nitrates et contiennent l'enzyme coagulase. La clé est un ensemble de questions qui, une fois terminées, aident à identifier les bactéries. Chaque question nécessite la réalisation d'un certain test.
Le test Gram positif ou Gram négatif détermine si des bactéries sont présentes dans l'échantillon. Le matériau est coloré et mis sous un microscope pour étude. Une coloration de Gram négative apparaît généralement en rose et indique qu'aucun organisme n'est trouvé. Les colorations de Gram positives sont généralement violettes et ont généralement plus de structures sur la lame.
Le test de la catalase est utilisé pour identifier les staphylocoques, une lecture positive, ou les streptocoques, une lecture négative. Les bactéries catalase-positives absorbent l'oxygène, tandis que les bactéries catalase-négatives sont généralement anaérobies.
Le test à la nitrate réductase détermine si une bactérie produit l'une des deux enzymes, la nitrate réductase ou la nitrite réductase. Le matériel est cultivé dans un milieu de culture contenant du nitrate de potassium. Si le substrat devient rouge et que des bulles apparaissent dans un tube Durham attaché, de l'azote est présent.
Le test de coagulase détermine si la bactérie contient de la coagulase, une enzyme de coagulation du sang. Le test est effectué à l'aide de sérum sanguin clair. Si l'enzyme est présente, le sérum se trouble et s'épaissit.