L'enzyme ADN hélicase décompresse la double hélice d'ADN pour lui permettre de se répliquer. L'ADN hélicase a une vitesse de rotation de 10 000 rotations par minute et se déplace devant la fourche de réplication. Il déroule en continu les brins d'ADN pour permettre à l'ADN polymérase de s'attacher à de nouveaux brins de nucléotides.
L'hélicase à ADN est une structure en anneau hexamérique de six sous-unités. Il décompresse la double hélice en brisant les liaisons hydrogène qui maintiennent les brins d'ADN ensemble. Après avoir été décompressé, le brin avec le groupe 3' -OH devient le brin principal, qui peut être répliqué immédiatement. Le brin avec le groupe 5' -OH est le brin retardé, et il est répliqué plus tard dans un processus connu sous le nom de réplication discontinue.