La spectrophotométrie est utilisée en médecine légale pour identifier des médicaments ou d'autres toxines. Lors de l'identification d'un médicament ou d'un produit chimique inconnu, les médecins légistes utiliseront la spectrophotométrie pour analyser comment la substance inconnue réagit à la lumière ultraviolette et infrarouge pour identifier son composition.
Une fois les rayons transmis, la lumière résultante est mesurée et enregistrée sur un graphique par le spectrophotomètre. Selon la structure chimique de la substance, une quantité variable de longueurs d'onde peut être absorbée. Bien que la spectrophotométrie ultraviolette ne soit pas extrêmement précise, elle permet de réduire considérablement les possibilités. La spectrophotométrie infrarouge est beaucoup plus précise, car les modèles de longueur d'onde résultants sont tous uniques. Le processus traditionnel de spectrophotométrie consiste à identifier d'abord les substances inconnues en utilisant des rayons ultraviolets pour affiner la liste des possibilités. Ceci est suivi par des rayons infrarouges pour identifier positivement le produit chimique.
Un spectrophotomètre contient généralement une source lumineuse avec une longueur d'onde connue, un emplacement pour contenir l'échantillon chimique et un système de lentilles et de cellules photoélectriques qui mesurent la lumière qui brille sur l'échantillon par rapport à la lumière qui le traverse. Généralement, une diminution de la quantité de lumière traversant la substance suggère l'existence de matériaux qui absorbent la lumière à la longueur d'onde connue.