L'ADN polymérase II est un type d'ADN polymérase : une catégorie d'enzymes qui synthétisent des copies identiques de l'ADN existant, permettant aux cellules en division de transmettre cette information génétique à leurs cellules filles. L'ADN polymérase II ne se trouve que chez les procaryotes, ou organismes unicellulaires, tels que les archées, et les bactéries simples dépourvues de noyaux et d'organites liés à la membrane.
Les procaryotes possèdent cinq types connus d'ADN polymérases, numérotées de I à V. Les ADN polymérases répliquent l'ADN en synthétisant des séquences de nucléotides, les composants moléculaires de l'ADN. Il n'y a que quatre types de nucléotides dans l'ADN. L'ordre spécifique de ces nucléotides est le code génétique qui contrôle la création, le maintien et le fonctionnement de toutes les cellules vivantes. Les ADN polymérases lisent l'ordre de ces nucléotides et les copient exactement pour créer de nouveaux brins d'ADN.
L'ADN polymérase II a été découverte dans la bactérie E. coli par Thomas Kornberg en 1970. L'ADN polymérase II soutient l'activité de l'ADN polymérase III, qui est la principale enzyme de réplication de l'ADN chez les procaryotes. Si l'ADN endommagé bloque la progression de l'ADN polymérase III, l'ADN polymérase II joue un rôle dans la reprise de la synthèse à un point différent du brin d'ADN, permettant à l'ADN polymérase III de poursuivre la réplication au-delà de la zone endommagée.
L'ADN polymérase II vérifie également l'exactitude des brins d'ADN nouvellement synthétisés. S'il y a des erreurs de réplication, l'ADN polymérase II supprime et rejette le segment d'ADN inexact.