Un croisement monohybride est un type d'expérience de sélection génétique entre deux organismes parents qui ont chacun un trait homozygote différent. Un exemple est un croisement entre une plante de pois avec une graine verte dominante et une autre avec une graine jaune récessive. Les descendants naissent tous avec des graines vertes.
Les expériences de croisement monohybride ont été popularisées par le moine autrichien Gregor Mendel, qui a fait de nombreuses expériences de ce type avec des petits pois. Mendel a croisé des plants de pois qui différaient par un seul trait facile à observer, comme la texture des graines, la couleur des graines, la couleur des fleurs ou le mode de croissance. En observant la progéniture de ces expériences de croisement, Mendel a pu prédire quels traits étaient dominants et lesquels étaient récessifs.