Les sucres ne produisent pas de résultats positifs dans un test de fermentation. La fermentation est le processus par lequel les sucres sont convertis en un produit chimique différent. Dans un test de fermentation, des sucres spécifiques sont utilisés pour déterminer la présence de bactéries. Un résultat positif serait la formation d'acide, de gaz ou d'alcool.
Les sucres utilisés dans un test de fermentation sont spécifiquement sélectionnés en fonction des produits qu'ils deviennent et des bactéries qui conduisent à ce résultat. Par exemple, la gélose au sel de mannitol tue la plupart des bactéries, à l'exception des bactéries Staphylococcus résistantes au sel. Seules certaines souches de Staphylococcus réagissent avec le mannitol de la gélose, comme Staphylococcus aureus, qui produit des sous-produits acides. La gélose au sel de mannitol a un indicateur de pH rouge qui devient jaune en présence de niveaux d'acidité plus élevés pour signifier cette réaction.
Les tests de fermentation sont réalisés dans différents milieux en fonction du résultat recherché et des bactéries testées. Les deux milieux les plus courants sont les bouillons et la gélose. La gélose est un composé gélatineux produit à partir d'algues qui permet à la plupart des bactéries de se développer à sa surface, et il peut être infusé avec divers nutriments et produits chimiques. Un bouillon est composé de solutions de produits chimiques. Les médias qui restreignent certains types de croissance sont appelés sélectifs. Les milieux qui montrent un changement physique et sont utilisés pour tester certains produits sont appelés différentiels. Ces milieux différentiels sont à la base de nombreux tests de confirmation, notamment des tests de fermentation.