La solution d'iode agit comme un mordant qui rend la tache plus visible et le colorant cristal violet se lie plus étroitement à la cellule bactérienne. L'ajout d'une solution d'iode ou de chlorure de potassium est la deuxième étape de la processus de coloration de Gram.
La coloration de Gram est la technique la plus courante et la plus utilisée pour différencier les bactéries à Gram négatif et à Gram positif. Ce processus est basé sur le principe que les bactéries réagissent différemment à leur environnement, réagissant ainsi (ou colorant) différemment, aidant à son identification.
Le processus de coloration des grains comprend les étapes suivantes :
Étape 1
La bactérie est traitée avec le colorant cristal violet, puis la solution d'iode.
Étape 2
Après la coloration, des agents décolorants sont ajoutés à l'échantillon. Cela déshydrate, rétrécit et resserre la couche de peptidoglycane des bactéries. Les agents colorants sont piégés dans les cellules des bactéries à Gram positif en raison de sa couche de peptidoglycane plus épaisse, tandis que les bactéries à Gram négatif ne pourront pas retenir la tache en raison de sa couche mince.
Étape 3
Une contre-coloration est ajoutée à l'échantillon pour le colorer en rouge. La coloration rouge ne change pas la couleur de la coloration violette des cellules gram positives. Inversement, il ajoute une couleur rouge aux bactéries à Gram négatif.
