Les hiboux adultes ne sont généralement pas la proie d'autres animaux comme source de nourriture, bien que les hiboux et les œufs de hiboux soient mangés par les renards, les chats, les lynx roux, les coyotes, les ratons laveurs et les ours noirs américains. Certains autres animaux qui mangent des oisillons ou des œufs comprennent les opossums, les corneilles et les corbeaux. Dans certains cas, les oisillons malades, affaiblis ou affamés sont consommés par leurs parents ou frères et sœurs,
Les faucons, les aigles d'Amérique du Nord et d'autres hiboux s'attaquent parfois aux hiboux adultes, mais cela est généralement causé par des conflits territoriaux. Certains hiboux adultes sont également victimes de leurs proies. Les humains représentent souvent le plus grand danger pour les hiboux en détruisant les habitats, laissant les hiboux avec moins de zones pour chasser et nicher. Cela provoque encore plus de conflits de territoire entre les hiboux qui se disputent moins de ressources disponibles. Les automobiles représentent également un grand danger pour les hiboux qui chassent et atterrissent le long des routes, car ces hiboux sont souvent heurtés par les voitures qui passent. Certains hiboux sont également tués lorsqu'ils volent dans des structures ou des objets artificiels, tels que des bâtiments, des clôtures en fil de fer barbelé ou des lignes électriques. Les humains tuent également intentionnellement des hiboux en utilisant des armes à feu, des pièges ou du poison. Certains hiboux sont empoisonnés involontairement lorsqu'ils ingèrent des rongeurs qui ont mangé du poison ou qu'ils entrent en contact avec le famphur topique sur le bétail.
Le harfang des neiges et le grand duc d'Amérique s'attaquent à d'autres espèces de chouettes car ils sont territoriaux. Si ces hiboux empiètent sur leur territoire, le harfang des neiges et le grand duc d'Amérique les mangent afin de réduire la concurrence. Plus il y a de hiboux dans un territoire, moins de ressources sont disponibles.
D'autres oiseaux de proie tels que les faucons et les aigles se nourrissent également de hiboux. Bien que cela ne se produise pas souvent, cela peut résulter du fait que les hiboux et les oiseaux de proie se disputent le même territoire. Habituellement, les hiboux sont trop gros pour que les oiseaux se battent efficacement, et les faucons et les aigles les laissent tranquilles.
Les renards et les lynx roux se nourrissent de jeunes hiboux ou de chouettes. Ils traquent et attaquent souvent les nids non gardés. Cependant, les hiboux adultes protégeant leurs nids peuvent tuer les renards et les chats.
