La chaleur est nécessaire lors de la coloration des spores car l'application de chaleur perturbe les cellules végétatives et provoque le rinçage de la malachite verte, ce qui permet ensuite à la contre-coloration de pénétrer dans les cellules. Il s'agit d'une étape obligatoire dans certains cas spores résistantes aux méthodes traditionnelles de coloration des spores.
Selon l'Austin Community College, la coloration est une technique utilisée par les scientifiques pour identifier les spores dans un échantillon de bactéries. L'une des étapes les plus importantes de la coloration des spores consiste à anticiper les propriétés de la spore analysée, car certaines d'entre elles sont résistantes aux processus de teinture traditionnels. Souvent, cela est dû à leur couche extérieure dure de protéines, connue sous le nom de kératine. Pour les endospores de cette nature, il est nécessaire d'utiliser une technique de coloration thermique afin de colorer les spores avec leur coloration principale, le vert malachite.
L'application de chaleur fragilise la paroi d'une cellule et lui permet d'être rincée et imprégnée de colorants. La cellule d'origine qui forme une endospore est appelée cellule végétative. Ces cellules sont plus sensibles à la chaleur que les endospores elles-mêmes et peuvent être rincées et teintes avec du vert malachite. Sur la base du gonflement et des réactions des endospores, ce processus de teinture peut ensuite être utilisé pour identifier les spores qui ont des couches dures et protectrices.
