Les Iroquois parlaient six langues différentes, dont l'onondaga, le mohawk, le sénèque, le cayuga, l'oneida et le tuscarora. Les langues ont des racines avec d'autres langues amérindiennes, comme le huron et le cherokee.
Les langues iroquoises étaient parlées par plusieurs tribus amérindiennes différentes. Par exemple, la langue Oneida était parlée par le peuple Oneida, originaire de New York mais ayant des réserves situées en Ontario et au Wisconsin. Malheureusement, les langues des Iroquois sont en danger car de plus en plus d'Amérindiens se concentrent sur l'anglais plutôt que sur leur langue maternelle. Pour la langue Oneida, par exemple, il ne reste que quelques dizaines de locuteurs dans le monde, la plupart des gens ne sachant dire que quelques expressions et mots clés.