Quelle est la fonction du chargement du colorant en électrophorèse?

La fonction de chargement du colorant dans l'électrophorèse est de permettre à l'échantillon d'ADN de s'enfoncer dans les puits du gel et de permettre aux scientifiques de suivre visuellement l'échantillon d'ADN lorsqu'il traverse le gel. Électrophorèse sur gel est une méthode utilisée par les scientifiques pour séparer l'ADN en brins de différentes tailles. Le colorant de charge rend l'échantillon d'ADN plus dense que le tampon de fonctionnement.

La différence de densité force l'échantillon d'ADN à s'enfoncer dans le fond du puits et empêche l'échantillon de se diffuser dans le tampon. Les colorants de chargement consistent à suivre les colorants qui migrent avec les échantillons d'ADN. Le glycérol et le bleu de bromophénol sont un mélange couramment utilisé pour créer un tampon de chargement. Le glycérol se lie à l'ADN et le rend plus lourd, tandis que le bleu de bromophénol colore l'ADN. Une solution de bromure d'éthidium est généralement utilisée lors de l'exécution d'une électrophorèse sur gel. Le bromure d'éthidium est un produit chimique qui peut être vu sous un éclairage ultraviolet. Le bromure d'éthidium et d'autres colorants fluorescents se lient aux échantillons d'ADN et brillent lorsqu'ils sont placés dans un transilluminateur. La quantité de colorant utilisée est cruciale lors de l'exécution d'une électrophorèse sur gel. Des colorants spécifiques sont en corrélation avec certaines tailles de bandes dans les échantillons d'ADN. Trop ou trop peu de colorant peut masquer la taille attendue de l'échantillon d'ADN.