En microbiologie, une culture mixte montre la présence de deux ou plusieurs types d'organismes. En règle générale, les cultures mixtes ont plusieurs souches et espèces de bactéries collectées à partir d'un seul échantillon.
Dans le domaine médical, des cultures sont ordonnées pour déterminer si un patient a une infection bactérienne ainsi que pour identifier quelles bactéries sont la cause de la maladie. Les cultures sont prélevées sur différents sites du corps en fonction du type d'infection suspectée. Les échantillons peuvent provenir du sang, du liquide céphalo-rachidien, d'une plaie ouverte, de l'urine et des crachats.
Les échantillons d'expectorations donnent souvent des cultures mixtes. Étant donné que le patient crache les expectorations des poumons, l'échantillon peut être contaminé par des bactéries buccales normales, ce qui entraîne plusieurs types de bactéries dans la culture.