Les tarentules se reproduisent sexuellement par la jonction du sperme et de l'ovule. Les mâles transfèrent le sperme à leurs pédipalpes avant l'accouplement. Comme c'est le cas chez la plupart des espèces d'araignées, les tarentules mâles sont plus petites que les femelles, ce qui rend la copulation dangereuse pour elles.
Les tarentules mâles sont sexuellement matures après leur mue finale. Les mâles errent à la recherche d'une femelle et l'accouplement a lieu près de son terrier ou de son abri. Lorsque le mâle localise une femelle, il tisse une toile de sperme où il dépose son sperme avant de le transférer dans ses pédipalpes. Les tarentules mâles et femelles se font face et le mâle utilise ses éperons tibiaux, de petits crochets sur sa première paire de pattes, pour maintenir les mâchoires de la plus grosse femelle en place et loin de lui. Il utilise ensuite ses pédipalpes pour déposer du sperme dans les organes reproducteurs de la femelle sous son abdomen. Les tarentules mâles quittent le territoire de la femelle peu après l'accouplement pour éviter d'être tuées ou mangées. Dans la nature, les tarentules s'accouplent souvent en été ou au début de l'automne, mais la femelle stocke le sperme dans son corps jusqu'au printemps. La femelle tisse une toile spéciale et y dépose des œufs avant d'introduire le sperme. Une fois la fécondation effectuée, elle enveloppe les œufs dans un sac et le porte avec ses crocs jusqu'à l'éclosion des œufs un à trois mois plus tard.
