Les hiboux sont des carnivores ; ils ne sont pas omnivores. Les hiboux se nourrissent principalement de petits mammifères tels que les lapins et les rongeurs ainsi que d'oiseaux et d'insectes. Certaines espèces de chouettes se concentrent sur les poissons. Le harfang des neiges adore les lemmings et peut en consommer plus de 1 600 par an, soit trois à cinq par jour.
Les hiboux ont des serres ou des griffes qui les aident à attraper des animaux et à se briser le crâne. Les hiboux ont également des becs incurvés qui les aident à se déchirer et à consommer les animaux qu'ils attrapent. La plupart des hiboux chassent la nuit, bien que certains hiboux, comme le harfang des neiges, chassent aussi bien le jour que la nuit.