Les requins bouledogues se nourrissent principalement de poissons osseux et d'autres requins, y compris les juvéniles de leur propre espèce. Plus rarement, ils mangent également des tortues marines, des dauphins, des oiseaux marins, des calmars et des mammifères terrestres nageurs. En plus des habitats marins, ce sont les seules espèces de requins présentes régulièrement en eau douce.
Les requins bouledogues sont un candidat pour les espèces de requins les plus dangereuses d'un point de vue humain en raison à la fois de leur grande taille et de leur présence dans des habitats d'eau douce tels que les rivières. Ils semblent lents lorsqu'ils nagent mais peuvent se déplacer très rapidement lorsqu'ils poursuivent des proies. Leur environnement de prédilection est les eaux côtières peu profondes, bien qu'elles soient également présentes dans les eaux plus profondes. Ils ont une distribution mondiale dans les eaux côtières tropicales et subtropicales.
Il y a au moins 69 attaques enregistrées par des requins bouledogues sur des humains, dont 17 attaques mortelles. Cependant, de nombreuses attaques d'espèces non identifiées sont probablement dues à cette espèce, compte tenu de sa taille et de sa proximité fréquente avec les populations humaines. La plupart des régions qu'il fréquente ont de mauvais registres de tels événements, de sorte que le véritable bilan des attaques de requin bouledogue est inconnu. Le requin bouledogue n'est pas une espèce particulièrement ciblée par la pêche, mais il est fréquemment capturé par accident dans les opérations de pêche commerciale.
