Le cycle de vie d'une chauve-souris commence lorsque la mère donne naissance à une seule chauve-souris, qui se nourrit ensuite du lait maternel pendant six semaines. En moins de deux mois, les chauves-souris volent et cherchent de la nourriture, atteignant leur maturité au bout d'un ou deux ans. Les chauves-souris des climats tempérés peuvent vivre plus de 10 ans.
Les grandes chauves-souris brunes peuvent donner naissance à des jumeaux, et la chauve-souris rousse de l'Est porte des portées. Les taux de mortalité infantile sont élevés chez les jeunes chauves-souris en raison de défauts génétiques, d'accidents et de maladies, et de nombreuses jeunes chauves-souris ne parviennent pas à devenir indépendantes dans la nature. Cependant, les chauves-souris adultes ont un faible taux de mortalité car elles sont protégées des intempéries et des prédateurs pendant la journée. Les chauves-souris développent également une immunité contre les maladies lorsqu'elles vivent en colonies. Les dossiers indiquent que certaines grandes chauves-souris brunes, petites brunes et grandes chauves-souris en fer à cheval vivent plus de 20 ans. D'autres chauves-souris vivent depuis plus de 30 ans.
