Quand une chienne est en chaleur, un chien mâle intact et sexuellement mature dans la région peut se montrer anxieux et agressif envers les autres chiens mâles. Il se désintéresse de tout sauf de l'accouplement. Un chien mâle castré agit généralement normalement autour d'une chienne en chaleur.
Le marquage urinaire est un comportement courant chez un chien mâle en présence d'une chienne en chaleur. Il marque à cause de son niveau d'excitation et pour attirer l'attention de la femelle. Les chiennes en chaleur marquent également l'urine, et les hormones dans l'urine attirent les chiens mâles. Un chien mâle peut sortir de son jardin s'il sent l'urine de la chienne, car l'odeur peut transporter jusqu'à un kilomètre et demi.
Les chiens mâles sont agressifs les uns envers les autres lorsqu'une femelle est en chaleur parce qu'ils se disputent son affection. Ils veulent tous les deux s'accoupler avec elle et peuvent se battre pour elle.
Comme la stérilisation d'un chien mâle implique l'ablation de ses organes sexuels et des hormones qu'ils produisent, il n'agit pas différemment autour d'une femelle en chaleur. Cela peut prendre entre 6 et 8 semaines pour que les hormones quittent son corps. Un chien mâle stérilisé à un âge avancé peut conserver son ancien comportement.