Les hyènes tachetées ont généralement une alimentation riche en grands herbivores terrestres, en particulier les zèbres, les gazelles, les buffles et les gnous. Bien qu'elles se comportent parfois comme des charognards, les hyènes tachetées sont principalement des chasseurs.
Les hyènes tachetées sont très adaptables et chassent presque tous les animaux herbivores lorsque les sources de nourriture communes sont introuvables. Ils habitent une grande partie de l'Afrique, donc leur régime alimentaire change avec l'emplacement. Les autres proies préférées des hyènes comprennent l'élan, le topi, l'impala, le phacochère, le springbok, le koudou, le lièvre et certains animaux domestiques ou de ferme. Ils ont également été observés en train de chasser des rhinocéros et des hippopotames. Ces hyènes sont souvent en concurrence directe avec les lions, ce qui fait que chaque espèce vole ou pille la chasse de l'autre. La seule zone connue où les hyènes tachetées se procurent la majorité de leur alimentation en divaguant est en Zambie.